Sanger dizileme nedir, zincir sonlandırma nasıl işler?

Sanger Dizileme Nedir?

Sanger dizileme, DNA\'nın belirli bir parçasının dizisini belirlemek için kullanılan klasik bir yöntemdir. 1977 yılında Frederick Sanger tarafından geliştirilmiştir. Bu yöntem, DNA\'nın bir örneği üzerinde çalışarak dizideki nükleotidlerin sırasını belirlemeye olanak tanır.

Zincir Sonlandırma Nasıl İşler?

Zincir sonlandırma, Sanger dizileme sürecinin temel bir aşamasıdır. Bu aşamada, normal nükleotidlerin yanı sıra \"dideoksinükleotid\" (ddNTP) adı verilen özel nükleotidler kullanılır. Bu nükleotidler, DNA zincirinin uzamasını durdurur. İşleyişi şu şekildedir:

• Öncelikle, DNA\'nın bir örneği, bir primer ve DNA polimeraz enzimi ile birlikte reaksiyona sokulur.
• Bu noktada, normal nükleotidler (dNTP) ile birlikte ddNTP\'ler de eklenir.
• Eğer bir ddNTP DNA zincirine dahil olursa, zincirin uzaması durur.
• Bu işlemin sonucunda, her bir ddNTP\'nin eklenmesi, belirli bir uzunlukta DNA parçaları oluşturur.
• Sonuç olarak, farklı uzunlukta DNA parçaları elde edilir ve bu parçalar elektroforez ile ayrılarak dizilimleri belirlenir.

Bu yöntem, özellikle genetik analiz ve biyomoleküler araştırmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır.